| 栽培技术 | | 多孢分离： 该法是利用子实体弹射许多孢子在同一培养基上，让其萌发、自由交配，从而获得纯母种的方法。该法简便易行，在食用菌选种中应用普遍。
（1）整菇孢子弹射法：该法适用于伞菌类的孢子采集。在无菌室（箱）中，将经消毒处理的整只种菇插入无菌平皿孢子收集器里，之后使用透明玻璃钟罩将其罩住，于见光、适温下使菇自然弹射孢子。24h后，将玻璃钟罩打开，从培养皿内获取孢子。
（2）试管插割法：在无菌箱内，迅速用无菌试管插割种菇有菌褶一侧，直至取下组织块。用无菌接种镐将组织块菌褶朝下推至距斜面培养基1cm处，塞好棉塞即可。于25～28℃条件下见光竖立培养至12h左右，在无菌操作条件下用尖头镊子取出组织块。继续于25～28℃的条件下暗光培养，2～3天后，会看到孢子萌发成星芒状的孢子菌落。
（3）三角瓶钩悬法：在无菌箱内，将耳片或菌盖用无菌水洗涤，无菌纱布吸干，取一个事先灭菌好的带培养基的三角瓶，棉塞内裹金属钩，钩取种菇块前，将金属钩经火焰灭菌后一端钩住耳片或菌盖（菌褶朝下），之后迅速塞好棉塞，于室温下见光培养1～2天，至培养基表面获得孢子粉时即可。
（4）贴褶法：在无菌箱内，用无菌镊子夹取一片即将弹射孢子的菌褶，使其一端蘸取无菌水，贴至试管斜面培养基上方，塞好棉塞即可。于25～28℃条件下见光培养12h左右，在无菌操作条件下用尖头镊子取出菌褶。继续于25℃的条件下暗光培养，2～3天后，会看到孢子萌发成星芒状的孢子菌落。
2.单孢分离法：单孢分离是从收集到的多孢子中将单个孢子分离出来，分别培养，作为育种的材料。该法是利用子实体弹射许多孢子制成孢子悬浮液，利用稀释法、平板划线分离法、器械分离法和毛细管法获取单孢子的方法。该法在食用菌育种中应用普遍。单孢分离的方法常用的主要有涂抹法和梯度稀释点样法两种。
（1）涂抹法：通过整菇孢子弹射法、试管插割法、三角瓶钩悬法和贴褶法等方法获得大量多孢子。之后配制无菌孢子液，用已沾湿无菌水的接种环，从前面获得的孢子粉上沾取孢子，在无菌条件下，插入盛有无菌水的三角瓶内振荡稀释成适宜浓度的孢子悬浊液。在无菌条件下，用无菌的接种环蘸取孢子悬浊液，在平板内培养基上轻划数条“Z”形线，使蘸到接种环上的孢子悬浊液沿“Z”形线均匀分散开。之后将平板培养基置于25℃下遮光培养。待孢子萌发后，在无菌条件下，用无菌的接种针挑取“Z”形线上的单孢群落，并通过镜检来确定是否为单孢菌丝。
（2）梯度稀释点样法：首先配制无菌孢子液，通过整菇孢子弹射法、试管插割法、三角瓶钩悬法和贴褶法等方法获得大量多孢子。用已沾湿无菌水的接种环，从前面获得的孢子粉上沾取孢子，在无菌条件下，插入盛有无菌水的三角瓶内振荡稀释成适宜浓度的孢子悬浊液。接着配制梯度孢子液，取5支试管，分别装9mL蒸馏水，经高压灭菌制成无菌水。用无菌注射器吸取1mL孢子悬浮液于第1支试管中，摇振使其分散；再从第1支试管中吸取1mL注入第2支试管……如此直至稀释到第5支试管。这样按无菌操作规程将孢子悬浊液配制成梯度孢子悬浮液，每个梯度间的孢子液浓度稀释10倍。之后在无菌条件下，用无菌的接种环蘸取每个梯度孢子液分别在平板内划线操作。之后将各平板培养基置于25℃下遮光培养。待孢子萌发后，在无菌条件下，用无菌的接种针挑取“Z”形线上的单孢群落，并通过镜检来确定是否为单孢菌丝。 |
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