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记录所在位置 农产品加工技术->食品中农用化学品残留检测方法
名称
吲熟酯检测方法
目标化合物
  吲熟酯、CIA[5-氯-3(1H)-吲唑乙酸]。
仪器设备及器具

  带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪[HPLC(UV)]

  液相色谱-质谱仪(LC/MS)

试剂

  除下列试剂外,使用附录所列试剂(见备注)

  三氟乙酸:高效液相色谱用。

  CIA标准品:含CIA99%以上。

标准品

 

试验溶液的制备

  1 提取方法

  准确称取约1kg样品,加入500mL 1mol/L盐酸,搅碎混合均匀。

  在相当于20.0g样品的量中加入2mL 5mol/L盐酸和100mL丙酮,均质后,抽滤。滤纸上的残留物中加入2mL 5mol/L盐酸和50mL丙酮均质,按上述同样过滤。合并所得的滤液,40以下浓缩至约40mL。加入100mL 25%氯化钠溶液和2mL 5mol/L盐酸,用100mL50mL乙醚∶正己烷(21)混合溶液振荡提取2次。提取液在40以下浓缩,除去溶剂。残留物中加入5mL甲醇溶解。

  2 水解

  在1所得的溶液中加入5mL 4mol/L氢氧化钾溶液,加塞,室温下不时振摇、混合,放置1h。反应液中加入40mL 25%氯化钠溶液和5mL 5mol/L盐酸,每次用50mL 乙醚∶正己烷(21)混合溶液振荡提取2次。提取液中加入无水硫酸钠脱水,滤取无水硫酸钠后,滤液在40以下浓缩,除去溶剂。残留物中加入5mL乙酸乙酯溶解。

  3 净化方法

  在色谱管(内径15mm)中注入5g悬浮在乙酸乙酯中的柱色谱用硅胶(粒径63μm200μm),其上面再装入约5g无水硫酸钠。柱中注入2所得的溶液后,舍弃流出液。再顺次注入15mL乙酸乙酯和30mL乙酸∶乙酸乙酯(0.1100)混合溶液,舍弃各流出液。接着,注入150mL乙酸∶乙酸乙酯∶甲醇(0.18020)混合溶液。溶出液在40以下浓缩,除去溶剂。残留物溶解在0.01%三氟乙酸∶甲醇(137)混合溶液中,准确至5mL作为试验溶液。

操作方法

  1 标准曲线的制作

  用0.01%三氟乙酸∶甲醇(137)混合溶液将CIA标准品配制成0.1mg/L5mg/L的溶液数点,分别注入20μLHPLC中,用峰高法或峰面积法绘制成标准曲线。

  2 定量试验

  注入20μL试验溶液于HPLC中,按照第5章的标准曲线求得CIA的含量,按下式求得包括CIA的吲熟酯含量:

吲熟酯(包括CIA)的含量=CIA的含量×1.13

测定条件

  1 HPLC

  检测器:UV(波长299nm)

  柱:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm),内径4.6mm、长150mm

  柱温:40

  流动相:三氟乙酸∶甲醇(137)混合溶液。

  保留时间标准:20min

  2 LC/MS

  柱:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)内径2mm3mm、长150mm

  柱温:40

  流动相:三氟乙酸∶甲醇(137)混合溶液。

  主离子:m/z 211197

  进样量:5μL

  保留时间标准:20min

测定低限

  0.05mg/kg(以吲熟酯计)

注意事项

  1 分析值

  将吲熟酯转变为CIA后,对CIA进行定量,其含量乘以系数换算成吲熟酯的含量,此为吲熟酯的分析值。

  2 检测方法概述

  本方法在盐酸酸性下用丙酮从样品中提取吲熟酯和CIA,转溶于乙醚∶正己烷的混合溶液中。用甲醇-氢氧化钾溶液将吲熟酯水解为CIA,硅胶柱净化后,HPLC(UV)测定CIALC/MS确证(文献1)

  3 注意点

  3.1 吲熟酯和CIA易分解或吸附,从提取到水解必须迅速进行。

  3.2 除本检测方法外,还有从样品中提取吲熟酯和CIA,水解后,用乙醚、三氟化硼和正丁醇的混合物丁酯化,合成硅酸镁柱净化后,GC(FTD)GC(NPD)测定的方法(文献2)

检测方法来源

  专家研讨会上制定的检测方法。

备注

附录

  1. 1-甲基咪唑:纯度99%以上。

  2. 222-三氟乙醇:特级。

  3. 2-巯基乙醇:纯度99%以上。

  4. 3-甲基丙酸:纯度98%以上。

  5. 3-戊酮:特级。

  6. m-氯过苯甲酸:纯度70%以上。

  7. N-甲基N-亚硝基-p-甲苯磺酰胺:纯度98%以上。

  8. N-甲基双三氟乙酰胺:纯度95%以上。

  9. ο-硝基苯甲醛:特级。

  10. p-二甲基氨基苯甲醛:特级。

  11. β-葡萄糖苷酶:其效价要求为:在37pH5.0条件下,1mg该酶在1min内从水杨醇葡萄糖苷中分解出4μmol12μmol的葡萄糖。

  12. 氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg):在内径12mm13mm的聚乙烯管中填充1000mg氨基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  13. 氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充360mg氨基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  14. 氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg氨基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  15. 胺基磺酸:特级。

  16. 苯磺酸钠:纯度98%以上。

  17. 苯磺酰基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg苯磺酰基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  18. 苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱(265mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充265mg苯乙烯二乙烯苯共聚物或具有同等分离特性的物质。

  19. 苯乙烯二乙烯苯共聚物柱:在内径20mm、长300mm的不锈钢管中填充以凝胶浸透的色谱用苯乙烯二乙烯苯共聚物或具有同等分离特性的物质。

  20. 丙磺酰基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg):在内径12mm13mm的聚乙烯管中填充1000mg丙磺酰基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  21. 丙酮:取300mL丙酮,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去丙酮;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11gγ-BHC更高的峰。

  22. 丙烯酰胺共聚物结合丙三基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充360mg丙烯酰胺共聚物结合丙三基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  23. 玻璃纤维滤纸:化学分析用。

  24. 碘代三甲基硅烷:纯度95%以上。

  25. 碘化钾-淀粉试纸。

  26. 多孔性硅藻土柱(保持20mL):在内径20mm30mm的聚乙烯管中加入保持20mL量的柱色谱用颗粒状多孔性硅藻土或具有同等分离特性的物质。

  27. 二丁基羟基甲苯:特级。

  28. 二甘醇一乙醚:纯度99%以上。

  29. 二甘油:纯度98%以上。

  30. 二氯甲基硅烷:纯度98%以上。

  31. 二氯甲烷:取300mL二氯甲烷,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去二氯甲烷;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11g γ-BHC更高的峰。

  32. 二氯甲烷:特级。

  33. 分子筛:天然碱金属或碱土金属硅酸钠。

  34. 酚酞溶液:溶解1g酚酞于100mL乙醇中。

  35. 氟化钾:特级。

  36. 甘油基丙基硅烷基化硅胶小柱(360mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充360mg甘油基丙基硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  37. 高纯度氮气:纯度以体积分数计在99.999%以上。

  38. 高氯酸钠:特级。

  39. 硅胶小柱(1000mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充1000mg柱色谱用硅胶或具有同等分离特性的物质。

  40. 硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg柱色谱用硅胶或具有同等分离特性的物质。

  41. 硅胶小柱(690mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充690mg柱色谱用硅胶或具有同等分离特性的物质。

  42. 硅胶小柱(避光,690mg):在用避光材料包装的内径8mm9mm的聚乙烯管中填充690mg柱色谱用硅胶或具有同等分离特性的物质。

  43. 硅藻土:化学分析用。

  44. 过二硫酸钾:一级。

  45. 过氧化钠:特级。

  46. 合成沸石:孔径0.3nm

  47. 合成硅酸镁小柱(900mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充900mg合成硅酸镁或具有同等分离特性的物质。

  48. 环己基甲硅烷基化硅胶小柱(2000mg):在内径15mm16mm的聚乙烯管中填充2000mg环己基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  49. 环己基甲硅烷基化硅胶小柱(避光、1000 mg):在用避光材料包装的内径12mm13mm的聚乙烯管中填充1000mg环己基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  50. 环己基甲硅烷基化硅胶小柱(避光、2000mg):在用避光材料包装的内径15mm16mm的聚乙烯管中填充1000mg环己基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  51. 活性炭:色谱用。

  52. 活性炭小柱(500mg):在内径12mm13mm的聚乙烯柱中填充500mg活性炭或具有同等分离特性的物质。

  53. 甲醇:取300mL甲醇,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去甲醇;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11gγ-BHC更高的峰。

  54. 甲基橙溶液:溶解0.1g甲基橙于100mL水中。

  55. 甲基异丁基酮:特级。

  56. 碱性氧化铝小柱(1710mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充1710mg碱性氧化铝或具有同等分离特性的物质。

  57. 邻苯二甲醛:纯度99%以上。

  58. 磷酸二氢钾:特级。

  59. 磷酸氢二钾:特级。

  60. 磷酸四-n-丁基铵:特级。

  61. 氯化钠:特级,如含有对该农用化学品成分物质分析有干扰作用的物质时,用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。

  62. 氯化亚铁:特级。

  63. 氯甲酸-9-芴甲酯:特级。

  64. 柠檬酸二铵:特级。

  65. 柠檬酸三钾:特级。

  66. 氢氧化硼钠:纯度98%以上。

  67. 乳酸:特级。

  68. 三氟化硼乙醚络合物:纯度99%以上。

  69. 三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶和苯砜酸甲硅烷基化硅胶混合小柱(200mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充200mg三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶和苯砜酸甲硅烷基化硅胶混合物或具有同等分离特性的物质。

  70. 三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg):在内径6mm9mm的聚乙烯管中填充1000mg三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  71. 三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg三甲胺基丙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  72. 三氯甲烷:取300mL三氯甲烷,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去三氯甲烷;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11g γ-BHC更高的峰。

  73. 三钠戊烷氰亚胺铁酸盐:特级。

  74. 三乙胺:特级。

  75. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg):在内径12mm13mm的聚乙烯管中填充1000mg十八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  76. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充360mg+八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  77. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(5000mg):在内径19mm的聚乙烯注射器型管中填充5000mg十八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  78. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg+八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  79. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(850mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充850mg+八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  80. 十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(避光、1000mg):在用避光材料包装的内径12mm13mm的聚乙烯管中填充1000mg十八烷基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  81. 十二烷基硫酸钠:纯度85%以上。

  82. 石墨碳/酰胺丙基甲硅烷基化硅胶层叠小柱(500mg/500mg):在内径12mm13mm的聚乙烯管中填充石墨碳和酰胺丙基甲硅烷基化硅胶各500mg或具有同等分离特性的物质。

  83. 水:蒸馏水,如含有对该农用化学品成分物质分析有干扰作用的物质时,用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。

  84. 四硼酸钠:特级。

  85. 四氢呋喃:特级。

  86. 羧甲基硅烷化硅胶小柱(1000mg):在内径10mm12mm的聚乙烯柱中填充1000mg羧甲

基硅烷化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  87. 无水氟乙酸:纯度99%以上。

  88. 无水硫酸钠:特级,如含有对该农用化学品成分物质分析有干扰作用的物质时,用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。

  89. 无水氯乙酸:纯度99%以上。

  90. 纤维素酶:其效价要求为:在37pH5.0条件下,1mg纤维素酶在1min内从纤维素中分解出29μmol的葡萄糖。

  91. 消泡用硅烷:消泡用。

  92. 亚硫酸钾:特级。

  93. 亚硫酸钠:特级。

  94. 氩气:纯度以体积分数计在99.998%以上。

  95. 盐酸吡啶:特级,如含有对该农用化学品成分物质分析有干扰作用的物质时,用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。

  96. 盐酸胍:特级。

  97. 乙醇:取300mL乙醇,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去乙醇;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11g γ-BHC更高的峰。

  98. 乙醇胺:特级。

  99. 乙二胺-N-丙基甲硅烷基硅胶小柱(500mg):在内径8mm9mm的聚乙烯管中填充500mg乙二胺-N-丙基甲硅烷基硅胶或具有同等分离特性的物质。

  100. 乙基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg):在内径12mm13mm的聚乙烯管中填充360mg乙基甲硅烷基化硅胶或具有同等分离特性的物质。

  101. 乙基溴化镁-乙醚溶液:3mol/L

  102. 乙腈:取300mL乙腈,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去乙腈;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11gγ-BHC更高的峰。

  103. 乙醚:取300mL乙醚,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去乙醚;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷以外的峰,不得出现比×10-11gγ-BHC更高的峰。

  104. 乙酸铵:纯度97%以上。

  105. 乙酸乙酯:取300mL乙酸乙酯,用磨口减压浓缩器进行浓缩,除去乙酸乙酯;残留物中加5mL正己烷溶解,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11g γ-BHC更高的峰。

  106. 异丙醇:特级。

  107. 荧光胺:纯度98%以上。

  108. 原甲酸三甲酯:一级。

  109. 原乙酸三甲酯:纯度98%以上。

  110. 月桂基硫酸钠:特级。

  111. 正己烷:取300mL正己烷,用磨口减压浓缩器浓缩至5mL,取其5μL,用带电子捕获器的气相色谱仪进行检测,色谱中除正己烷的峰外,不得出现比2×10-11g γ-BHC更高的峰。

  112. 正戊烷:纯度99%以上

  113. 中性氧化铝小柱(1710mg):在内径9mm10mm的聚乙烯管中填充1710mg中性氧化铝或具有同等分离特性的物质。

  114. 柱担体:气相色谱用,粒径150μm177μm的硅藻土,经酸和硅烷处理后使用。

  115. 柱色谱用硅胶:粒径63μm200μm130加热处理12h以上后,放干燥器中冷却。

  116. 柱色谱用硅胶:粒径150μm425μm130加热处理12h以上后,放干燥器中冷却。

  117. 柱色谱用合成硅酸镁:粒径150μm250μm130加热处理12h以上后,放干燥器中冷却。

  118. 柱色谱用活性氧化铝:中性,粒径63μm200μm

  119. 柱色谱用氧化铝:碱性,粒径50μm200μm

 

 

参考文献

  [1] 高附ら.食品卫生学杂志.20024330-34

  [2] 今月の农药编集室编.「改订4版农药登録保留基准ハンドブック」化学工业日报社,2003138-140

 

 

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