1. 茎尖剥离
(1)热处理
钝化发芽马铃薯病毒，马铃薯发芽后，将其置于37℃光照培养箱内，经2000勒克斯光照度每天处理12小时，经28天后可脱出病毒。
(2)取材和消毒
取材，剪取经处理的块茎芽，经清水漂洗半小时，剥去大叶片。消毒，超净工作台严格消毒。浸泡块茎芽于75%酒精内15秒，之后无菌水清洗2次，每次约5分钟。其后，放置0.1%氯化汞溶液中，浸泡8～10分钟，之后无菌水清洗3～5次，每次约5分钟。消毒后，放于经灭菌的培养皿中备用。
(3)剥离和接种
取经消毒处理的块茎芽，于超净工作台解剖镜下放大4～8倍，用解剖针剥离，直到露出圆滑的生长点为止。然后，用解剖针切取带1～2个叶原基的0.1～0.3毫米茎尖生长点，接种于无菌培养基上。
(4)培养
经接种好的茎尖，放置于培养室内培养。要求：光照每天10小时，强度控制在2000勒克斯，室内温度维持在18～25℃。培养期间，用同样的培养基接种1～2次，经3～6个月的培养，形成基础苗。经检测合格后，可用于扩大繁育。
2. 组培苗生产
(1)培养基制备
选用MS培养基。配方：大量元素＋微量元素＋铁盐＋有机物+萘乙酸＋6-苄氨基嘌呤＋赤霉素＋3%蔗糖＋0.7%琼脂，pH值5.8。
(2)培养基及硫酸纸灭菌
配好的培养基，放置培养瓶内，经封口膜封口，置于高压灭菌锅内。充分灭菌后，放置无菌室内备用。硫酸纸用耐温耐压塑料袋包好，一起灭菌。
(3)无菌接种
接种前，打开紫外线灯，照射30分钟，充分杀菌，防污染。接种时，工作人员注意清洗双手，穿着工作装。接种用的超净工作台、镊子、剪刀、培养皿、转接瓶、基础苗瓶等，均应用75%的酒精棉球擦拭一遍表面。之后，培养皿、镊子、剪刀要放酒精灯火焰上灼烧灭菌，接种前把转接瓶口置于火焰上转动灭菌。准备接种，剪刀剪苗1～2厘米，最好带1～2个芽的茎段，放在硫酸纸上待用；用镊子将带芽茎段插入无菌培养基中，每瓶插15～20个茎段。
接种完毕，封上封口膜，用橡胶圈扎紧，标记上日期、名称。
(4)组织培养
将接种好的培养瓶置于温度18～25℃、日照时间14～16小时/天、照度2000～3000勒克斯条件下培养30天，待小苗长至10厘米左右时，进行下一轮快繁转接。苗龄20～25天、苗高7～10厘米、茎粗0.6～0.8毫米、叶5～8片、生根后移栽入防虫网室。
3. 原原种生产
(1)苗床准备
基质用珍珠岩，铺成高8～10厘米的移栽苗床，同时铺平整理好墒面。
移栽前，严格消毒。用福尔马林和高锰酸钾的混合液，密封熏蒸苗床。充分消毒后1周，方可移栽脱毒苗。
(2)脱毒苗移栽
脱毒苗用镊子取出后，放清水中冲洗根部培养基。苗床浇透水后，按株距5厘米、行距14厘米开沟条栽。栽植时，注意压实基部珍珠岩。同时，加盖薄膜，起到保湿保温，提升成活率。1周后，可考虑揭膜。
(3)田间管理
苗期盖膜的，3～4天浇水1次。不盖膜的，每1天浇水1次。夏季蒸发量大，应多浇水。冬季温度低，建议少浇水。现蕾期、开花至成熟期，保持基质湿润即可。夏季气温高时，注意网室通风，同时用遮光率为70%的遮光网遮挡幼苗至成活，15天后揭开遮光网，尽量满足马铃薯生长所需要的光照；冬季气温低时，覆盖地膜增温。苗高10厘米后用珍珠岩培土2～3次，培土高度为每次一个茎节。根据网室调查情况，发现晚疫病中心病株及时喷施58%甲霜灵锰锌500～800倍液防治，每7天一次，连续2～3次。用NPK三元复合肥加减尿素、过磷酸钙、硫酸钾配制成一定浓度的营养液(也可用MS培养液)，按照不同生育时期的不同营养液配方，适时适量浇施。同时，观察植株的营养生长情况，马铃薯苗生长较差时，可加大营养液的施用量和施用次数，并辅以根外追肥；植株营养生长过剩时，应减少营养液的施用量和施用次数。
(4)采收
生理成熟时，准备人工收获。收获前1周，清理上部块叶，及时运往网室。收获时，避免机械损伤。
收获后的原原种，根据不同品种分级，5克以上为特级、3～5克为一级、2～3克为二级、1～2克为三级，分级好的原原种，用通风透气性好的竹筐贮藏。贮藏时，注意通风，确保原原种的生理贮藏条件。贮藏期间，适量翻拣1～2次，确保原原种品质。
4. 选地整地
理想的生产地，要求海拔2100米以上，通风良好，排便方便，土层深厚，中性或微酸性的沙壤土。而且，最近3年内为种植过茄科类作物。同时，周边60米，禁止种植茄科作物、豆科作物、十字花科作物、桃树。
4. 种薯准备
种薯质量要求高，应符合GB 18133和GB 4406的要求。 |