一、发酵罐液体菌种的制备
1、熬汁:先把200克的土豆清洗干净,先去皮,然后再去芽切片,再取白灵菇的菇根适量,与大约50克的麦麸,一并放入不锈钢锅中用大火烧开后,再转为小火熬煮至熟后,捞出土豆片,过筛取汁。
2、配料:熬好的汁过筛完毕后,再将葡萄糖约20克左右,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,维生素B1毫克溶入熬好的汁中,配成培养基,稍加搅动保证能充分搅匀,。
3、装罐:把培养基混匀后,舀入或注入发酵罐内。罐内一定要装好并盖上上盖,密闭罐体,加热40 分钟,温度要一直维持在121℃,进行培养基灭菌。在灭菌的时候,应该开通管线和阀门,让培养基内所有气体和液体只要经过的部位,就能完全灭菌,以防止制种后期杂菌感染。
4、接种培养:灭菌结束后,待它自然降温或者用冷水冷却或至培养温度,然后按无菌操作规程,用火焰消毒进行接种。接种完毕后,严格控制在26~28℃的条件下培养。待48~72小时后,培养液的颜色由深变浅,菌液中菌球与液体混为一体时,即可用于接种。
二、菌袋的制作与培养
1、栽培料的配制:棉籽壳100千克、麸皮5千克、玉米粉5千克、石灰3千克、石膏2千克。
2、堆制发酵:准备大约300千克左右的堆制发酵用料,堆一个高1.3米左右,宽1.5米左右的堆。堆的不要太大也不要太小,堆的太小不易升温,会导致发酵不透;堆的太大会导致中间缺氧,而且不便翻堆。发酵料拌水湿度百分之60%左右,并加石灰2%,使pH值为8~8.5。建好堆后需要打孔通气,孔距为30厘米,堆上方打1排,侧面打2~3排。当料堆温度达55℃左右的时候,一直要保持恒温48小时后,再进行第1次翻堆。当料堆温度达60~ 70℃时,每隔1天就要翻堆1次,并充分换位。约一周后,待料变成了均匀棕褐色、而且质地均匀、富有弹性、料味纯正、料表面有较多的放线菌时,证明料已经发酵成功,就可以散堆降温。
3、装袋灭菌:发酵好的料必须在测试的时候pH达到7.5~8.5,含水量达到60%才可装袋。还要将装好的料彻底灭菌,在高压下灭菌2~3小时,或在常压下灭菌14~16小时。
4、接种培养:灭好菌的菌袋冷差不多却到30℃时,就可以移入接种室内接种了,必须要在无菌条件下接种,接种量40毫升/袋,以能覆盖菌袋表面为宜。液体菌种接种速度快,建议安排4个人配合接种最佳,这样才能做到快打口盖,快接种,快封口盖。
5、接种后,首先把环境温度控制在26~28℃,少通风或不通风,尽量不要让菌袋移动。1周后翻垛检查有没有杂菌污染,发现有杂菌污染后,将有杂菌的清理出去。大概18~20天后,差不多菌丝可以满袋,较固体菌种能缩短8~10天。待菌丝发满后,将菌袋移至低温处,或者对出菇棚进行白天盖草帘,晚上揭草帘的反向操作,并加大通风,低温结合喷水对它进行刺激,促进菇蕾形成。 |